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[掲載日情報:2017/06/30 現在]

新規高機能プロテインAクロマトグラフィー用担体 KANEKA KanCapA

分子デザインにより改変したFc領域に特異的に結合する新規プロテインAクロマトグラフィー用のセルロース担体です。 優れたアルカリ耐性と高い抗体結合容量があります。バイオ医薬品の研究開発に有用です。
本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。

MEMO

KanCapA Ligandについて


 天然型のProteinA のC末端ドメインは,抗体のFc領域だけでなく,Fab領域にも結合します。Protein Aが抗体のFc領域とFab領域の両方に結合している場合,抗体を溶出するには,酸性度の高い溶液が必要となります。KanCapAは,変異したProtein AのCドメインを五量体化させたタンパク質で,高アルカリ耐性を有し,Fab(Fragment Antigen Binding)への結合能が減少しています。そのためマイルドな条件での抗体の溶出が可能となります。

新規高機能プロテインAクロマトグラフィー用樹脂KANAKA KanCapA

天然型Protein AとKanCapAの違い

特長

  • アルカリ耐性があり,(図1)。繰り返し洗浄できます。しかもProtein Aが剥離がありません。
  • マイルドなpH条件で抗体溶出できます(図2)。
  • 高い抗体結合能を示します(図3)。
  • 速い流量での操作が可能で,スケールアップも容易です(図4)。

新規高機能プロテインAクロマトグラフィー用担体 KANAKA KanCapA

図1:Life cycle study
0.1 Mまたは0.5 MのNaOHでアルカリ性洗浄の繰り返し試験(左図)。
0.1 M水酸化ナトリウムで繰り返し試験を行ったときの収率およびProtein Aの浸出(右図)
接触時間:15分,検出限界未満(1ppm未満)のリガンド浸出は1ppとしてプロット。



新規高機能プロテインAクロマトグラフィー用樹脂KANAKA KanCapA

図2:溶出プロファイルの比較
5 mg/mLのレジンに IgG をロード。 溶出条件:pH 3.5 または 3.0,Strip solution:1 M Acetic acid.
KanCapAは, Fab結合部位がないため,狭いpH範囲でMabのすべてのタイプ(Mab A,Mab B,IgG)を溶出することができます。



新規高機能プロテインAクロマトグラフィー用樹脂KANAKA KanCapA

図3: 動的結合容量の滞留時間依存性
KanCapAは4~6分の滞留時間で高い動的結合容量を示す。



新規高機能プロテインAクロマトグラフィー用樹脂KANAKA KanCapA

図4:様々なサイズのカラムにKanCapAを充填したときの圧力/流速の関係
充填床の圧力は,全圧からシステム圧力を差し引くことによって計算した。



表1 充填カラムの充填効率の評価(1%アセトンのパルスインジェクション)

Packing method I.D. (cm) Height (mm) Plates/m Asymmetry
Flow packing 4.4 200 5,710 1.14
Axial compression 7 199 6,063 1.06
Flow packing 10 201 5,276 1.18
Flow packing 30 200 5,208 1.17
Axial compression 45 233 4,712 1.09

測定条件

  • 試料:1%(v/v)アセトン
  • インジェクションボリューム:カラム容量の1%
  • 流速:60 cm/h

図4および表1は,充填カラムの圧力/流量特性および充填効率を示す(内径4.4~45 cm,高さ20 cm)。 10%グリセロール溶液を細胞培養溶液の代わりとしてシミュレートした結果,合理的な圧力上昇を示した。 KanCapを充填したカラムは,優れた圧力/流量特性を示す。



マトリックス 高架橋セルロース

平均粒径*1

65~85 μm
リガンド 組換え体Protein A(アルカリ耐性)
結合 還元的アミノ化

動的結合容量*2

≧35 mg (human polyclonal IgG/ml packed resin)
安定性 アフィニティクロマトグラフィー汎用試薬で安定
pH範囲 pH2~13
洗浄条件 0.1~0.5 M 水酸化ナトリウム
流速 最大500 cm/h (層高:20~25 cm)
滞留時間 ≧3 min(推奨:4~6 min)

保存条件*3

20%エタノールの懸濁液の状態で1~10℃で保存

*1 平均粒径は,累積体積分布の中間粒径です。
*2 5%動的結合容量は,前端分析(滞留時間3分)で測定しています。
*3 凍結禁止

価格

[在庫・価格 : 2017年11月22日 18時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
KNKカネカ
株式会社カネカ

KPA02-B025

KANEKA KanCapA

25ml

\150,000
(未発注)
追加
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新規高性能プロテインAクロマトグラフィー担体。

保存条件4℃,凍結禁止法規制等
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ニュース 2014年3月1日号 p.45

製品記事

KANEKA KanCapA

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KANEKA KanCapA Prepacked Column 1mL

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KANEKA KanCapA Prepacked Column 1ml

3pieces

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KANEKA KanCapA Prepacked Column 1ml

5pieces

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