試薬記事カテゴリー

日清食品ホールディングス株式会社
ニッシンショクヒンホールディングス / 日清食品ホールディングス株式会社
[掲載日情報：2011/05/13 現在]

化学物質による遺伝毒性の初期スクリーニングに有用な受託サービス ヒト細胞を用いた遺伝毒性試験受託サービスNESMAGET（R）

食品安全研究所（日清食品ホールディングス株式会社）の遺伝毒性試験受託サービスNESMAGET（R）は，p53R2の発現に基づくヒト細胞を用いた遺伝毒性試験法です。化学物質によってDNAが損傷を受けると，活性化したp53がDNA修復遺伝子であるp53R2に結合し，その発現を調節します。従来用いられているAmes試験や哺乳類細胞を用いるin vitro遺伝毒性試験と比較して，ヒト細胞を用いた本サービスは，ヒトに対する遺伝毒性発癌物質の検出に優れていると考えられています。
※NESMAGET（R）：Nissin's Evaluation Systems for MAmmalian GEnoToxicity
※本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。

特長

  • 野生型p53を発現するヒト乳癌培養細胞MCF-7を使用します。
  • 試験期間が24時間と短いため，納期は約1週間です。
  • 微生物では検出できなかった遺伝毒性物質の検出も可能です。
  • 従来の哺乳類細胞を用いるin vitro遺伝毒性試験に比べ，偽陽性反応が非常に少なくなります。
  • 少量の試験物質で試験が可能です（Ames試験と比べ1/100量）。
  • S9ミックスによる代謝活性化を必要とする化学物質にも適用できます。
  • 発光による検出のため，蛍光物質や色素なども試験できます。
  • あらゆる化学物質の初期スクリーニングに最適です。

原理

ヒト細胞を用いた遺伝毒性試験受託サービスNESMAGET<sup>（R）</sup>
DNAが損傷を受けると，DNA修復遺伝子であるp53R2が発現する。p53R2の発現をPGV-p53BS-Luc（p53R2由来p53結合配列を組み込んだホタルルシフェラーゼレポータープラスミド）でルシフェラーゼに変換し，発光で検出する。

試験方法概略

ヒト細胞を用いた遺伝毒性試験受託サービスNESMAGET<sup>（R）</sup>

ヒト細胞を用いた遺伝毒性試験受託サービスNESMAGET<sup>（R）</sup>
試験結果の一例

従来法との比較

NESMAGET（R）と従来法との比較
化学物質NESMAGET(R)従来法
Ames試験哺乳動物細胞を用いた
in vitroアッセイ		げっ歯類発癌性試験IARC
Adriamycin＋＋＋＋2A
Mitomycin C＋＋＋＋2B
Cisplatin＋＋＋＋2A
Bleomycin＋＋＋＋2B
5-FU－－＋±3
Acrylamide＋－＋＋2A
MNNG＋＋＋＋2A
PhIP＋＋＋＋2B
2,4-DAT＋＋＋＋2B
B[a]P＋＋＋＋1
Pyridine－－－＋3
Sodium ascorbate－－－－－

NESMAGET（R）：MCF-7細胞で試験を行い，濃度依存性を示し，有意なルシフェラーゼ活性の上昇が認められた時に陽性(＋)と判断。
従来法：Amesと哺乳動物細胞を用いたin vitroアッセイ（マウスリンフォーマTK試験および染色体異常試験），およびげっ歯類発癌性試験の結果は，NTPおよびTOXNETのデータを参照した。IARCはInternational Agency for Research on Cancerにおけるハザード評価を表す。

135種類の化学物質を用いた評価試験におけるNESMAGET（R）と従来法との比較
動物での発癌性試験や他の変異原性試験のデータが多く存在する変異原性物質および非変異原性物質から計135物質を選択し，発癌性の予測を行った。
Ames試験との比較一致率（NESMAGET(R) vs Ames試験結果一致率）81.5％
Ames陽性予測率（NESMAGET(R)陽性 vs Ames陽性）94.3％
Ames陰性予測率（NESMAGET(R)陰性 vs Ames陰性）67.2％
NESMAGET(R)陰性，かつ，Ames陽性の物質4物質
（発癌性を持たない）
NESMAGET(R)陽性，かつ，Ames陰性の物質21物質
（発癌性を有する）
げっ歯類発癌性試験との比較NESMAGET(R)の発癌性試験との一致率86.6％
Ames試験の発癌性試験との一致率71.1％
他の変異原性試験と発癌性試験の一致率74.0％

参考文献・特許
1. Ohno, K,. et al., Mutation Research, 588, 47～57 (2005).
2. Ohno, K,. et al., Mutation Research, 656, 27～35 (2008).
3. 哺乳動物細胞を用いた変異原性試験法，特許第4243716号.

試験実施条件

  • MCF-7細胞を使用
  • S9ミックス添加あり／なし条件で測定
  • 6段階の濃度で三重測定
  • 生存細胞数の測定

オプション

  • 濃度設定のための細胞毒性試験

ご注文方法／価格

試験依頼書に必要事項を記入の上，Excel File として電子メールに添付して当社受託・特注品業務担当までお送り下さい。 ご注文方法および価格などの詳細については，当社受託・特注品業務担当までお問い合わせ下さい。

お問い合わせ先（受託・特注品業務担当）

製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。

表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。

トップに戻る