試薬記事カテゴリー

ジーエルサイエンス株式会社
ジーエルサイエンス / ジーエルサイエンス株式会社
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[掲載日情報:2017/09/11 現在]

自然落下でExosome(エキソソーム,エクソソーム)を高純度精製できるカラム EVSecond(Exosome高純度精製用カラム)EVSecond / EVSecond L70(エクソソーム高純度精製用カラム)

血清,血漿および細胞培養上清などの試料から,自然落下でエクソソーム(Exosome)を高純度精製するサイズ排除クロマトグラフィーカラムです。緩和なPBSで溶出を行うため構造へのダメージもなく,精製エクソソームは幅広いアプリケーションに使用できます。新たに追加されたEVSecond L70は,混和時間が大幅に短縮され,また室温下で操作できるように改良されています。

本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。

ヒト血清

ヒト血清からのエクソソームの単離
ヒト血清200μlから,EVSecond L70またはEVSecondを用いて100μlずつ各溶出フラクションを回収した。いずれのカラムを用いても溶出のピークフラクションでアルブミンやIgGなどの血清タンパク質とエクソソームが効果的に分離されており,高純度のエクソソームが得られることが分かる。
:抗CD9-抗CD9サンドイッチELISAによるエクソソーム溶出位置の確認
:Bradford法による血清フリータンパク質の溶出位置の確認
データご提供:公益社団法人がん研究会 植田幸嗣先生

Quick-DNA/RNA MagBeadで品質評価

従来法との比較
密度勾配超遠心法,抗体アフィニティーによる精製,EVSecond による精製について比較した。各方法によって精製されたエクソソームをLC/MSで分析を行い,同定されたタンパク質の細胞内局在を示した。EVSecondは,フリータンパク質(Secreted)の割合が少なく,精製度が高い手法であることがわかる。

製品仕様

商品コードをクリックすると価格表がご覧いただけます。

  エクソソーム高純度精製用カラム
品名 EVSecond L70 EVSecond
商品コード 501021395 501021390 501021392
包装 10本 10本 25本
製品外観 #501021395 #501021395
カラム全長 110 mm 75 mm
原理 サイズ排除クロマトグラフィー(ゲルろ過)
精製方式 自然落下
試料の種類 血清,血漿,細胞培養上清など
操作温度 室温 低温室
使用前の転倒混和 10~30分程度 数時間
試料量 50~1,500μl 50~700μl
ブロッキング後の洗浄操作 PBS 1,500μl×3回 PBS 700μl×6回

関連製品

品名 GL-SPE SPOフラクションラック 商品コード 501050450
製品外観 製品概要
#501050450外観
サイズ:約300(W)×300(D)×150/190(H) mm
#カラムスタンド
製品に付属のカラムスタンドを変更することで,EVSecond L70,EVSecondの両方に対応します。
通液や抽出液のフラクション回収が簡単に行えるEVSecond専用ラック。
①カラムスタンド:EVSecond L70,またはEVSecondを装着します。
②回収用ラック:回収用チューブ(1,5 ml,2 ml)を8本までセットできます。レバーを引くことで回収用チューブの切換が可能です。
③回収用ラックホルダ:回収用ラックを6セット設置できます。

MEMO

EVSecond開発背景


近年,細胞外分泌小胞(Extracellular Vesicle)であるExosome(エクソソーム)が,がん転移などの様々な疾病要因となっていることが示唆されています。そのため,エクソソームはバイオマーカーや生体メカニズム解明の標的として研究されています。しかし,エクソソームはその大きさが生体マトリクス中にあるタンパク質などの分子サイズと近いため,既存の分離手法では単離するのが難しいとされてきました。EVSecondは,エクソソームの高純度精製に特化したサイズ排除クロマトグラフィーカラムです。血清,血漿,細胞培養上清などから簡単に高品質のエクソソームを単離します。EVSecond L70は,従来品のEVSecondに比べ,混和の時間が大幅に短縮され,また室温下で操作できるように改良された精製カラムです。

* EVSecond:Extracellular Vesicle Isolation by Size Exclusion Chromatography on Drip Column


特長

  • 超遠心機などを使用せず,自然落下のみの簡単操作でエクソソームを精製できます。
  • 超遠心法やポリマー沈殿法に比べて,高純度のエクソソームが単離できます。
  • 特定エクソソームの表面抗原に対する抗体を用いたアフィニティー精製法とは異なり,表面抗原のプロファイルの影響を受けないため,バイアスの少ないエクソソームが得られます。
  • 試料中のフリーRNAやフリータンパク質を効果的に除去できるため,網羅的miRNA解析や高感度プロテオーム解析に適しています。
  • 精製されたエクソソームはPBS中に単離・溶出されるため,構造的ダメージもなく幅広いアプリケーションに使用可能です。

操作方法概略

操作方法概略
  1. 充填剤をよく転倒混和してスタンドに設置し,保存液を捨てる。
  2. 0.22μmフィルターを通した細胞培養用ウシ血清(FBS)でブロッキングする。
  3. PBSで洗浄する。
  4. 0.22μmフィルターを通した血清,血漿などのサンプルをロードする。
  5. PBSを適量流し,エクソソーム溶出画分を回収する。

初回は抗CD9-抗CD63サンドイッチELISAや,抗CD9ウエスタンブロッティングなどでエクソソーム溶出フラクションの位置を確認して下さい。

FAQ

価格

[在庫・価格 : 2017年11月22日 18時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
GLIジーエルサイエンス
ジーエルサイエンス株式会社

501021395

EVSecond L70

10pieces

\58,000
(未発注)
追加
GLIジーエルサイエンス
ジーエルサイエンス株式会社

501021390

EVSecond

10pieces

\44,000
(未発注)
追加
GLIジーエルサイエンス
ジーエルサイエンス株式会社

501021392

EVSecond

25pieces

\98,000
(未発注)
追加
GLIジーエルサイエンス
ジーエルサイエンス株式会社

501050450

GL-SPE EXO フラクションラック

1set

\140,000
(未発注)
追加
[在庫・価格 : 2017年11月22日 18時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
GLIジーエルサイエンス
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501021395

EVSecond L70

10pieces

\58,000
(未発注)
追加
説明文

血清,血漿および細胞培養上清などの試料から,自然落下でエキソソーム(Exosome)を高純度精製するサイズ排除クロマトグラフィーカラム。EVSecondより混和時間が大幅に短縮され,また室温下で操作できる。

保存条件4℃法規制等
Genbank NoGene Accession NoProtein Accession No
掲載カタログ

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EVSecond

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\44,000
(未発注)
追加
説明文

血清,血漿および細胞培養上清などの試料から,自然落下でエキソソーム(Exosome)を高純度精製するサイズ排除クロマトグラフィーカラム。※受注発注品。 ※送料として1,000を別途いただく製品です。

保存条件4℃法規制等
Genbank NoGene Accession NoProtein Accession No
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EVSecond

25pieces

\98,000
(未発注)
追加
説明文

血清,血漿および細胞培養上清などの試料から,自然落下でエキソソーム(Exosome)を高純度精製するサイズ排除クロマトグラフィーカラム。※受注発注品。

保存条件法規制等
Genbank NoGene Accession NoProtein Accession No
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501050450

GL-SPE EXO フラクションラック

1set

\140,000
(未発注)
追加
説明文

EVSecond専用のラック。

保存条件法規制等
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