世界初！血液凝固反応の初期に産生する微量トロンビンを検出 SMAT^®シリーズ：初期トロンビン産生検出キット

独自の蛍光トロンビン基質を用いて血漿試料の微量な初期トロンビン産生を検出するキットです。4種類のキットがあり、それぞれ血液凝固カスケードを部分的に活性化することで、試料の潜在的な血液凝固活性を評価することができます。疾患が血液凝固に及ぼす影響の研究や、凝固阻害剤開発研究などに有用です。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

SMAT^®（Smart Analysis of Thrombin Production）は、独自に設計された蛍光性トロンビン基質を用いることで、トロンビン検出感度を劇的に向上させています。これによって、従来は検出が難しかった反応初期の微量トロンビン産生を評価することに初めて成功しました。SMAT^®を用いることで、これまで見過ごされてきた疾患や薬物が血液凝固初期段階に及ぼす影響を評価することが可能となります。

※ 全血や血清試料の評価はできません。
※ 溶血やビリルビン値が高い血漿試料は正確に評価できないことがあります。
※ 別途必要な機器

血液凝固カスケードは、血管壁に存在する組織因子（Tissue Factor: TF）が血液中の活性化第Ⅶ因子（FⅦa）と複合体を形成し、第Ⅹ因子（FⅩ）を活性化することで開始します（下図緑矢印 → で示したTF経路）。SMAT^®-TFは血漿試料に反応開始剤としてTFを添加することでTF経路を誘導し、TF経路による初期トロンビン産生を評価するキットです¹。
また本キットは、TF経路によって誘導される活性化第Ⅷ因子（FⅧa）と第Ⅸ因子（FⅨa）から成る内因性経路（下図青矢印 → で示した経路）を遮断して検査することから、TF経路に対する高い特異性を有しています。試料が潜在的に有するTF経路の活性化能を知ることができるため、炎症、動脈硬化、がん、感染症などの疾患においてTFが血液凝固に及ぼす機序の解明に有用です。

血液凝固カスケードにおけるTF経路（下図緑矢印 → で示した経路）と、内因性経路（下図青矢印 → で示した経路）は、いくつかのPathwayでクロストークすることでトロンビン産生量を増幅します。例えば、TF経路によって産生したトロンビンが第Ⅷ因子（FⅧ）や第Ⅸ因子（FXI）を活性化（正のフィードバック）し、内因性経路を誘導することが知られています。近年、TF経路初期に一過性で形成される、活性化第Ⅹ因子（FⅩa）、活性型第Ⅶ因子（FⅦa）およびTFの三者複合体（FⅩa-FⅦa-TF）が、FⅧを活性化し、内因系テンナーゼ複合体（Intrinsic Xase complex、FⅧa-FⅨa）を形成させることが明らかになりました^{2, 3}。

SMAT^®-FⅧ/IXは、この新規クロストーク反応に基づく初期トロンビン産生量を評価するキットであり、反応開始剤によってFⅩa-FⅦa-TFの形成が誘導されるように設計されています。FⅧはその機能異常や欠損が重篤な出血を招くことはよく知られていますが、逆に過剰に存在する場合は血栓症を引き起こします。本キットは、血友病などに代表されるFⅧやFⅨの活性低下の評価や、抗血栓治療薬・止血薬の開発、モニタリング研究に有用です。

参考文献
2. Kamikubo, Y., et al., "Selective factor VIII activation by the tissue factor-factor VIIa-factor Xa complex.", Blood, 130(14), 1661～1670 (2017). [PMID: 28729433]
3. 神窪 勇一, 「内因系テンナーゼ複合体の新たな形成メカニズム：外因系凝固開始複合体中の活性型第X因子による第VIII因子の選択的活性化」, 日本血栓止血学会誌, 32(1), 42～45 (2021). [DOI: 10.2491/jjsth.32.42]

SMAT^®-APCD（Active Pro-Coagulant Detector）は、他のSMAT^®キットとは異なり、反応開始剤にタンパク質の凝固開始因子を含んでいません（凝固反応に必要な最低限の物質が含まれています）。そのため、健常の血漿試料であれば初期トロンビン産生が誘導されませんが、特定の疾患モデルの血漿試料であれば、試料に微量に含有している何らかの凝固開始因子によって微量の初期トロンビン産生が誘導されることがあります。これによって疾患などが血液凝固に与える潜在的な影響を評価できます。また、コントロール血漿に外部試料（細胞培養液、体液、生物製剤など）を添加して測定をすることで、試料に含まれる血液凝固因子や促進物質を探索・評価することも可能です。

TFPI（Tissue Factor Pathway Inhibitor）は、TF-FⅦaやFⅩaの活性を阻害することでトロンビン産生を抑制する因子です。TF経路ではTFPIというブレーキ役によって初期トロンビン産生量が制御されており、TFPI活性の異常は種々の疾患に関連していることが知られています。TFPIで制御される初期トロンビン産生量は微量であるため、これまでTFPI活性を評価することは困難でしたが、SMAT^®の高感度トロンビン検出によって血漿中のTFPI活性を評価することが初めて可能となりました。SMAT^®-TFPIは反応開始剤とは別に抗TFPI中和抗体が内容物として含まれており、抗TFPI中和抗体添加時、非添加時のトロンビン産生量の差によって試料中のTFPI活性を算出します。抗TFPI治療薬の開発やモニタリング研究などに有用です。

本キットによる初期トロンビン産生評価を代行する受託試験もご利用いただけます。受託試験には対象の血漿試料をご郵送いただく必要があります。詳細は、当社受託・特注品担当（✉ jutalu@funakoshi.co.jp）までお問い合わせ下さい。

血液凝固カスケード各因子（プロトロンビン、Factor Ⅷ/Ⅸ/Ⅸa/Ⅹa）の酵素活性を測定できる一連のキットです。
※ 画像をクリックすると、Rossix社製品の掲載記事をご覧いただけます。

ROXシリーズ：血液凝固因子の活性測定キット